如果色譜柱柱頭堵了,壓力升高了,反沖完了效果很好!也有很多人,包括廠(chǎng)商的工程師說(shuō)不建議反沖,沖了會(huì)影響柱效。那么,今天我們就來(lái)分析討論一下,色譜柱到底能不能反沖,以及背后的原因是什么?絕大多數(shù)液相色譜柱里面充滿(mǎn)了直徑幾個(gè)微米的硅膠小球,這些硅膠小球在高壓條件下被填入了色譜柱以后,色譜柱的兩端需要用篩板封起來(lái),這樣既能夠讓流動(dòng)相順利通過(guò),又保證硅膠小球老老實(shí)實(shí)呆在色譜柱里面,不會(huì)跟著流動(dòng)相跑出來(lái)。
當(dāng)然篩板的孔徑要足夠小,不然就封不住硅膠小球。
但是入口篩板孔徑如果做得特別小,也會(huì)產(chǎn)生一個(gè)問(wèn)題,那就是很容易被樣品堵塞。樣品稍微有一點(diǎn)沒(méi)處理好,或者沒(méi)有溶解好,篩板就被堵了,柱壓就升高了,甚至柱子就廢掉了。
所以,很多廠(chǎng)商就決定把色譜柱入口的篩板孔徑做得比出口篩板的孔徑大一些,這樣既能保證硅膠小球不會(huì)被沖出色譜柱,也能讓柱頭不那么容易堵塞。
但是,這種情況下,色譜柱往往就不能反沖了。
因?yàn)槿绻礇_,在把堵塞在入口篩板上的污染物沖出來(lái)的同時(shí),柱頭的填料可能也會(huì)被沖出來(lái),造成柱效的降低,甚至色譜柱的報(bào)廢。
總結(jié)一下:
如果色譜柱出入口篩板孔徑一致的話(huà),那就可以反沖,正反使用都無(wú)所謂,即使是色譜柱上面標(biāo)注了方向。
但是如果色譜柱出入口篩板孔徑不一致的話(huà)(一般是入口孔徑大于出口孔徑),反沖就有可能造成填料漏出,柱效降低等等。
建議:
粒徑小于3.5um的小粒徑的色譜柱不要反沖。因?yàn)樵绞切×街?,出入口篩板的孔徑越不一致。
類(lèi)似Poroshell的核殼柱不要反沖。
絕大多數(shù)5um的色譜柱都可以反沖。